【摘要】  探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)在鼻息肉小知识：息肉多见于成年人，是由鼻部粘膜持久水肿所致，以反常反映和慢性炎症为首要启事。临床表示可分为进行性鼻塞、鼻涕增多、嗅觉障碍及头痛等症状。鼻息肉可单发或多发，单侧或两侧，但大都为多发性及两侧性。    鼻息肉是鼻炎的一种，良多鼻息肉患者之前都不体味鼻息肉的症状，迟误医治鼻息肉的最好期间。耳鼻喉病院专家说，鼻息肉的医治越早越好，要想提早医治鼻息肉，就要先体味鼻息肉的症状，早发现早医治。    所有鼻息肉症状的共同点：    鼻息肉患者多有延续性鼻塞，为甚么会鼻塞呢?耳鼻喉病院专家说，鼻塞是因为鼻腔内毛细血管畅通不畅，导致毛细血管膨胀引发鼻塞，还可能会有嗅觉减退，措辞有闭塞性鼻音，睡觉打呼噜和张口呼吸。别的，在鼻塞的同时还会有流涕，并伴有头痛，耳鸣、耳闷和听力减退。鼻息肉对平常生活和工作影响极年夜。...组织中的表达及其在鼻息肉发病中的意义。方法 将鼻息肉患者分为A、B 组,A组为Ⅱ型1、2期患者,B组为Ⅱ型3期及Ⅲ型患者。另有20例鼻中隔偏曲患者的正常下鼻甲组织作对照组。采用免疫组化SP法检测三组VEGF的表达。结果 正常鼻黏膜中VEGF的染色呈弱阳性,而在A、B组鼻息肉组织中VEGF的阳性率明显高于对照组,B组中阳性率和阳性细胞数均高于A组;VEGF在鼻息肉组织中主要定位于基底膜周围的炎性细胞和上皮细胞以及腺体、血管周围和血管壁内皮细胞。结论 VEGF通过在鼻息肉组织中过度表达促进息肉组织内的血管增殖和炎性细胞聚积,促进鼻息肉的发生发展。

【关键词】  鼻息肉 血管内皮生长因子 免疫组织化学

(Department of Otolaryngology, General Hospital of Jinan Iron and Steel Group Corporation, Jinan , China;Department of Otolarynglogy & Head and Neck Surgery, Qilu Hospital of Shandong University, Jinan , China)

To evaluate the role of vascular endothelial growth factor (VEGF) in the pathophysiology of nasal polyps.  Methods  Forty patients with nasal polyps were divided  into two groups: group A (representing type 2 phase 12) and group B (representing type 2 phase 3 and type 3). Also 20 normal inferior turbinate tissues served as the control. The expression of VEGF in three groups was determined by an immunohistochemical method.  Results  The expression of VEGF was weak in normal nasal mucous but strong in nasal polyps. The expression rate of VEGF in groups A and B was significantly higher than that in the control group, furthermore it was higher in group B than in group A. VEGF is  mainly located in the inflammatory cells and epithelial cells surrounding the basilar membrane and inflammatory cells and endothelial cells surrounding the vessels. Conclusion  Overexpression of VEGF in nasal polyps may contribute to growth of vessels and accumulation of inflammatory cells, and as a result, enhances development of nasal polyps.

Key words:  Nasal polyps； Vascular endothelial growth factor； Immunohistochemistry   

鼻息肉为鼻部常见病、多发病，其发病与多种因素有关 ，已有大量的报道证实鼻息肉的病理组织学是以上皮增生、间质水肿、血管增生扩张、腺体增殖亢进为主要特征,同时伴有多种炎性细胞浸润,其中尤以嗜酸性粒细胞为特异性改变。近来有文献表明［１２］,VEGF亦参与慢性炎症的病理机制,但有关鼻黏膜在正常和炎症病理条件下VEGF的表达、诱生、调控因素等方面的研究较少且意见不一。本研究应用免疫组织化学方法检测VEGF在正常鼻黏膜和鼻息肉（病）组织中的表达,以期为临床上研究和治疗鼻息肉病提供必要的理论基础和实践依据。

1  材料与方法

1.1  临床资料  鼻息肉标本40例，均取自我院2002年9月至2003年12月住院的鼻息肉患者，其中男18例，女22例，19～55岁，平均34.7岁。患者既往均无变应性鼻炎小知识：鼻炎引发的鼻出血，要先医治鼻炎；若是是外伤或鼻内异物引发的鼻出血就要措置外伤，取出异物；若是是全身性疾病引发的鼻出血，则要针对这些疾病进行医治。...典型病史，无哮喘及阿司匹林耐受不良病史。参照（1997年,）慢性鼻窦炎鼻息肉临床分型分期及内镜鼻窦手术疗效评定标准［3］，根据鼻内镜检查及鼻窦冠状位CT结果分为两组， A组Ⅱ型1、2期22例，B组Ⅱ型3期及Ⅲ型18例。另取20例鼻中隔偏曲及鼾症患者的正常下鼻甲黏膜作对照，其中男12例，女8例，20～45岁，平均31.4岁，无变应性鼻炎、哮喘以及慢性鼻炎鼻窦炎病史。

1.2  试剂  鼠抗人VEGF单克隆抗体购自中杉金桥生物技术有限公司，二步法免疫组化检测试剂盒购自生物技术有限公司。

1.3  方法  将鼻内镜手术切除的标本迅速放入10%中性缓冲福尔马林液中充分固定，石蜡包埋，切片。每张切片先行HE染色复核诊断。VEGF免疫组织化学染色采用SP法。每张切片经DAB显色，苏木素复染，用PBS代替一抗作阴性对照。

1.4  结果判定

1.4.1  HE染色  嗜酸性粒细胞为分叶核、双核，以细胞浆出现粉红色颗粒为阳性。每个HE染色切片于炎性细胞聚集处选5个高倍视野（×400），手工计数嗜酸性粒细胞数、淋巴细胞和浆细胞数，取其平均值。

1.4.2  免疫组化染色  以细胞浆出现棕黄色染色为阳性细胞，400倍镜下随机选取10个视野，计数阳性染色和阴性染色的细胞数目，取平均值，计算阳性细胞比率。200倍镜下随机选取10个视野，计算阳性及阴性腺体及血管数量，取平均值，计算阳性表达率。

1.5  统计学处理  应用SPSS10.0软件行t检验。

2  结果
        
免疫组化染色结果显示，息肉组织中主要定位于基底膜周围的炎性细胞和上皮细胞以及腺体、血管周围和血管壁内皮细胞（彩图9～11）。HE染色结果显示，鼻息肉组织中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数量明显多于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01)，浆细胞数量无显著差异（P＞0.05）,见表1。鼻息肉组织中腺体和血管的数量均明显多于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.01)，见表2。鼻息肉组织中炎性细胞、腺体阳性表达率高于下鼻甲组织，差异有统计学意义（P＜0.05)，血管组织阳性表达率亦明显高于下甲组（P＜0.01)，两组上皮细胞阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。鼻息肉A、B两组各部分阳性表达率比较：B组炎性细胞、上皮细胞阳性表达率高于A组，差异有统计学意义（P＜0.01)，B组血管组织阳性表达率亦高于A组，差异有统计学意义（P＜0.05)，两组腺体阳性表达率差异无统计学意义（P＞0.05），见表4。（略）

3  讨论
    
VEGF又称血管通透因子，是一种开始从正常垂体滤泡细胞中分离出来的糖基化分泌性多肽因子,相对分子质量为34000～50000,以旁分泌方式特异地作用于血管内皮细胞并促使其分裂、增殖［46］,能够特异性地作用于血管内皮细胞,对血管生长具有强烈的诱导作用; 在炎症、创伤愈合等多种病理过程中发挥着重要的生理或病理作用。该因子是已知的最强的血管通透因子，抗组胺药及多种炎症抑制剂均不能抑制其血管通透作用。
    
VEGF表达的调节机制目前还不完全清楚,但局部氧浓度是调节VEGF分泌最为重要的因素。短时间缺氧(3h)可使VEGF的表达量增加3～4倍,而持续性缺氧(15h)可使VEGF的表达量增加8～10倍。缺氧上调VEGF基因表达的作用与一种缺氧诱导的特异性DNA结合蛋白缺氧诱导因子(HIF1)密切相关［7］。有研究认为, 低氧可能激活cSrc原癌基因而升高VEGF的表达［8］。而Goldberg等［9］发现,VEGF与另一种对低氧敏感性物质——促红细胞生成素在序列上有同源性 。
    
下鼻甲虽位于鼻腔最前部，但极少发生息肉,提示炎症不是唯一因素。中鼻道息肉的形成与炎性刺激、局部结构异常有关。研究证实,中鼻道息肉和中鼻甲息肉样变的组织中的血流量明显要比下鼻甲、鼻中隔部位的血流量低得多,鼻黏膜中的血管供应与鼻息肉的发生区域是一致的［10］。当鼻黏膜有炎症时,由于下鼻甲黏膜血管的扩张,中鼻道血流量可能更少,其结果可造成局部组织缺氧。外伤、炎症等因素可诱发多种细胞合成VEGF［11］,但缺氧是最强的诱发因素。鼻息肉最重要的组织特征是组织高度水肿。VEGF的血管通透效应是组胺的50000倍, 在鼻息肉组织的表达明显强于下鼻甲,认为息肉组织的高度水肿主要由VEGF引起［12］。因此,我们设想，中鼻道黏膜缺氧诱导VEGF的产生和分泌可能与鼻息肉的早期形成密切相关，VEGF导致血管通透性增加,血浆渗出增多,局部组织水肿,而这种早期的水肿使得局部组织的张力增加,挤压上皮;再加上缺氧使得上皮更易破裂，然后发生上皮破裂后的一系列变化,形成最初的息肉。这可能是鼻息肉最初形成并局限于中鼻道的重要条件,至少是一个可能的重要诱因。
    
本研究证实，鼻息肉组织中VEGF的表达比下鼻甲中明显增高, 这种增高的趋势与鼻息肉的生物学特征和临床特征有一定的联系和对应性。Ⅱ型3期及Ⅲ型VEGF的阳性率和强度要显著高于Ⅱ型1、2期者,证实了血管因素在鼻息肉的发生发展过程中的关系, 密集的血管形成对鼻息肉病的发展可能具有双重意义,一是作为水肿间质的水分来源, 二是作为浸润的炎性细胞的输送通道,其在鼻息肉病发生发展过程中的重要性是不言而喻的。
    
鼻息肉的组织病理学实质就是鼻黏膜的慢性炎性水肿。VEGF在正常鼻黏膜少量表达,参与鼻腔正常生理功能的调节;大量VEGF的表达,可促使黏膜血管通透性增高,促使并加重黏膜水肿,使正常鼻黏膜向息肉组织转化。总之,VEGF在鼻息肉的形成、发生、发展及复发过程中都具有极其重要的意义,值得深入探讨。